在当前的核酸食品检测工作中,微生物检测是探针重中之重,为了获得更为精准的技术检验食品安全检测结果,多种食品检测技术在不断发展,食品本文主要对核酸探针检测技术进行分析,应用此项技术能够在短时间内找到食品内部存在的核酸有毒物质,通过对该技术的探针应用分析,希望为更多食品检测工作提供参考建议。技术检验
1前言
微生物泛滥不仅会出现多种致病菌,食品更会产生严重的应用食品安全事故,严重时还会威胁人们的核酸生命安全。核酸探针检测技术不仅具有极高的探针精准度,更能降低食品检测经费与时间,技术检验便捷的食品检测方式使其得到广泛应用并迅速发展。
2核酸探针基本概述
对核酸探针这一全新检测方式加以分析,应用此种检测方式的主要部分为RNA探针,RNA探针带有指示标记,能够与被检测食品核苷酸序列的一段单链cDNA或是cRNA分子相互结合。在检测过程中,主要以特异性cDNA、cRNA与人工合成的寡核苷酸探针为主。核酸探针应用范围较为广泛,由于RNA为单链分子,在检测工作中,能够与被检测食品靶序列迅速反应,此类杂交反应效率较高,具有较为显著的应用效果。
3核酸探针的制备工作
在食品检测工作中,借助基因检测方式可以了解样品的位置与序列。此类食品检测方式,能够在探针辅助下,在最短时间内得到不同被检测食品的基因信息,并判断基因信息来源是否相同。要想确保检测工作的顺利开展,应确保核酸探针充分发挥作用。在核酸探针制备工作中,应重点关注以下2项内容。第一,应根据所选择食品,借助交叉反应,对其中变化较为显著的核酸片段进行分析。第二,应在制备前,明确食品内部标记物,对常见标记物进行分析。在当前食品检测工作中,主要通过32P、125I以及35S几种同位素进行分析,并以此为基础,进行核酸探针制备工作。
4核酸探针在当前食品检测工作中的具体应用
4.1应用于DNA与RNA为靶向检测方式
在食品检测工作中,重点应关注以下3项指标。第一,菌落总数检测工作。第二,大肠杆菌群和沙门菌的检测工作。第三,霉菌、酵母与毒素的检测工作。在这些检测工作中,细菌来源种类多样化。在具体检测工作中,需结合DNA遗传序列,开展检测工作。并在检测过程中,遵循生物特异性,对其中的DNA序列进行分析与对比,进而设计出合理的检测方式。其次,以RNA为靶向目标的检测试验。此种检测方式,多以AccuProbe基因为探针,在检测工作中借助荧光物质,将标记特异性单链作为检测探针,应用此种检测方式,能够与待测细菌中的核糖体形成RNA互补,进而形成相对稳定的DNA与RNA杂交体。在具体检测工作中,应选择适合检测样品的试验试剂,借助试剂将多余探针去除。在试验后续阶段,可以通过发光仪器设备,做好杂交标记工作。借助核酸探针,以RNA为靶向目标的检测方式相对简单,检测用时较短,检测正确率较高,应得到重视与推广。
4.2核酸探针应用于水产品检测工作
随着食品种类不断增加,核酸探针检测技术已经得到较为广泛的应用,普遍应用于基因测序、食品检测工作中。在以往的检测工作中,显微镜检测方式存在较大误差,难以保证检测结果的精确度。再加上不规范操作的影响,或是使用检测试剂不合理,缺乏检测经验,这些因素都会影响检测结果。因此,可以借助核酸探针检测方式,弥补传统检测方式的不足,应用科学检测原理,不断提升检测结果的可信度。例如,在水资源与水产品检测工作中,应以核酸检测为基础,对导致腹泻的大肠杆菌进行检测,在实际检测工作中,可以借助ST基因片段,判断水产品中是否含有此类物质。为确保相关水产品质量与安全,应在水产品销售前,对水产品进行检测。在水产品检测工作中,可以应用核酸探针检测方式,对水产品存在的过量微生物、细菌以及蠕虫进行检测与分析。结合核酸探针检测所得技术数据,明确水产品中的生物特点,才能有效鉴别其中的有害成分,最终提升水产品检测质量。要想维护水产品市场稳定发展,为消费者提供更为优质的产品,势必要做好水产品检测工作。
4.3核酸探针应用于肉制品检测
在肉制品检测工作中,常会检测出牛巴贝斯虫,此种寄生虫具有较高传染性,牛巴贝斯虫病为原虫病,多由泰勒焦虫感染所致。由于此类寄生虫寄生于病畜血细胞中,其检测难度较大,为保证食品安全,禁止病畜出现在市场中,应借助DNA探针检测方式,以核酸探针检测为主,并结合皂素处理方式,解决不能回收全部虫体的问题,进而提升核酸探针检测的有效性和灵敏度。首先,在检测工作中,应对畜禽血样进行收集与处理,将血样置于37℃水浴处理,确保血样融化。吸取100μL血样,在血样中加水至500μL,冰浴10min,以3000r/min进行离心处理,离心时间10min。当血样中的变性血红蛋白逐渐沉淀后,将上述被测物质转移至另一离心管中。与此同时,应对正常畜禽血液进行处理,借助健康畜禽白细胞对被测样品进行冷藏与稀释。每个稀释后的血样,相当于原血样中的50μL。对这一血样加以分析,稀释过后的病畜血样虫量较大。因此,为保证检测结果精确度,在本次检测工作中,最终确定检测稀释度为500μL。
在血样处理工作中,应采取以下3种方式,对血样进行处理。
(1)皂素处理方法,在上述血样中加入皂素,将皂素浓度控制在0.15%,并在处理完成后,在其中加入10mg氯化钠(NaCl)与0.5mg乙二胺四乙酸(EDTA)。将血样浓度控制在150mM与10mM中。在后续试验中,将血样在室内放置15min,在1×104r/min下进行离心处理,并将离心时间控制在5min。弃上相,并加入50μL去离子水,做好沉淀处理工作。
(2)可以借助乙酸处理方式,在上述稀释液中加入细胞裂解液,并补加10mgNaCl,在沉淀过程中,借助TEPH7.6悬浮液,5000rpm离心5min,弃上相,采取重复洗涤方式,得到去离子的悬浮沉淀物质。
(3)虫体消化方式,在提取虫体DNA后,应用乙醇过滤,借助离心方式,收取虫体DNA。在完成上述步骤后,借助点杂交方式进行试验,并对核酸探针检测结果加以分析,得到精准检验结果,保证食品安全与质量。
5讨论
食品安全问题尤为重要,近些年,食品安全问题频发,严重影响人们的健康与生活。在当前食品检测过程中,常见的是微生物污染问题,应借助核酸探针检测方式,及时发现产品内部存在的问题,从源头上加以管控,最大限度降低质量问题,为更多食品安全检测工作的开展打下坚实基础。
声明:本文所用图片、文字来源《质量安全与检验检测》2020年第5期,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系
相关链接:核酸,大肠杆菌,微生物,离心管
相关文章:
济南市场监管局开展集中行动 要让百姓“暖暖的”日粮添加中草药添加剂对猪肉品质的影响原创:渗透压摩尔浓度是什么?2012中我国窗展将推迟,行业资讯备孕妈妈群:了解必备信息、加入方法、获取小技巧!高等院校基础化学实验室规范化管理研究磷酸二氢根溶液标准物质研制 (三)备孕女孩受孕几率增加的健康饮食建议和体重注意事项挪威修订动物食品中药物残留限量规定条例马拉丁童装新品系列 童趣休闲 邂逅美好自然辽宁:强化食品生产安全监管 着力降低食品安全风险“月月十五查餐厅”突击检查奶茶店 “薄荷森林”水果盒中有小虫光伏突围不得不看这六个方面,行业资讯全国人大代表张武宗:过剩产能转型升级要准备“打恶仗”,行业资讯福州出台《餐饮连锁企业总部落实食品安全主体责任指导意见》山东济南市场监管局这些青年入围“济南市五四出彩典型”厦门启动2020—2021年度守合同重信用企业公示活动申报工作多地发布污染物减排计划 涉及玻璃,行业资讯西安灞桥:扎实推进食品安全“守底线、查隐患、保安全”专项行动备孕时间的考量因素与家人离世时间的关系光伏行业受益国家扶持政策再崛起,行业资讯北京东城加强餐饮企业食品安全监管“共享法庭”入驻温州平阳 开启消费纠纷化解新模式环保飓风之下的沙河玻璃行业,行业资讯门窗企业不能仅靠“粉丝经济”打造综合实力是关键,行业资讯浙江丽水:开展儿童化妆品质量抽检行动西安:专项行动落实落细 筑牢校园食品安全防线市场监管总局发布《国家标准样品管理办法(征求意见稿)》打击整治养老诈骗专项行动︳保健仪器可以改善血压、血脂、血糖?浙江平湖市场监管局已立案调查美国对华光伏“二次双反”罚单将至 ,行业资讯黑龙江佳木斯市“五一”期间冷链食品监管不放松38项服务事项“一单掌握” 陕西西安发布知识产权公共服务事项清单我国初次制造出大尺寸异形红外玻璃 填补了空白区域,行业资讯福建举办“重家教 立家训 传家风”主题活动启动部署暨故事分享会《一仆二主》电视剧全集热播 一仆二主江疏影张嘉译演绎老少恋【电视剧】风尚中国网男性备孕:如何控制欲望和禁欲以提高成功率?厦门海沧开展“5•20世界计量日”宣传活动“景快办、办德好、镇暖心” 江西景德镇创优三大环境江西“双随机、一公开”监管迈出新步伐如何正确给宝宝换尿布?换尿布步骤详解